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各試劑在使用前平衡至室溫,。
1. 加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔,、待測(cè)樣品孔,。除空白孔外,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)溶液或待測(cè)樣品100ul,,輕輕混勻,,37℃,120分鐘,。
2. 棄去液體,,甩干,不用洗滌,。
3. 每孔加檢測(cè)溶液a工作液 100ul,,37℃,60分鐘。洗板3次,,350ul/每孔,,甩干。
4. 每孔加檢測(cè)溶液b工作液 100ul,,37℃,60分鐘,,洗板5次,,甩干。
5. 依序每孔加底物溶液90ul,,37℃避光顯30分鐘,。
6. 依序每孔加終止溶液50ul,終止反應(yīng),。用酶聯(lián)儀在910nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的光密度od值,。
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