上海谷研實(shí)業(yè)有限公司為您提供猴-白helisa試劑盒說(shuō)明書。產(chǎn)品名稱
  猴-白h elisa試劑盒說(shuō)明書
英文名稱
 monkey hbh (hemoglobin h) elisa kit
上海谷研實(shí)業(yè)有限公司為您提供猴-白helisa試劑盒規(guī)格,。
優(yōu)點(diǎn)：
1.進(jìn)口抗體----,、靈敏、特異
2.操作----吸附均勻,，吸附性好,，空白值低，孔底透明度高
3.的優(yōu)化方案----重復(fù)性高,，---性強(qiáng)
4.購(gòu)買本公司的elisa試劑盒,，免費(fèi)代測(cè)
5.技術(shù)服務(wù)要求：，規(guī)范,，
6.適用于---,、組織勻漿液、細(xì)胞培養(yǎng)上清液,、尿液等多種類型的樣本
7.可檢測(cè)動(dòng)物類型豐富：人,、猴、大鼠,、小鼠,、---、黃金地鼠,、兔,、豬、犬,、牛,、綿羊、山羊,、鵝,、雞、蝦,、河蟹,、鱸魚、斑馬魚等
8.可檢測(cè)指標(biāo)齊全：---因子,、血管生成素,、動(dòng)脈粥樣硬化因子,、趨化因子、生長(zhǎng)因子基質(zhì)金屬蛋白酶,、脂肪因子等等
9.經(jīng)濟(jì),、實(shí)惠、---,，完善,、穩(wěn)定的實(shí)驗(yàn)體系，的科研隊(duì)伍,，的實(shí)驗(yàn)設(shè)備,、準(zhǔn)確---的實(shí)驗(yàn)結(jié)果
 



試劑準(zhǔn)備：

1. 使用前將所有的試劑和標(biāo)本緩慢均衡至室溫(18-25oc)，試劑不能直接在37oc溶解,。
2. 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品)：每瓶標(biāo)準(zhǔn)品加入標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1ml,，蓋好后室溫靜置大約10分鐘，同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解,，其濃度為2000pg/ml,。準(zhǔn)備7個(gè)稀釋標(biāo)準(zhǔn)品的ep管，每個(gè)ep管中加入150μl的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液,，如圖所示依次倍比稀釋成不同的梯度,， 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液(0pg/ml)直接作為空白孔。為---實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,，每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液,。
3. 濃洗滌液：用580ml蒸餾水或去離子水將20ml濃洗滌液稀釋至600ml，進(jìn)行30倍稀釋,。

樣本實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備：
elisa試劑盒液體樣本：包括血清,、血漿、尿液,、胸腹水,、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等,。
1血清
室溫---自然凝固10-20分鐘后,，離心20分鐘左右2000-3000轉(zhuǎn)/分。仔細(xì)收集上清,。保存過(guò)程中如有沉淀形成,，應(yīng)再次離心。
2血漿：
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇edta,、檸檬酸鈉或---作為抗凝劑,，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右2000-3000轉(zhuǎn)/分,。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心,。
3尿液：
用無(wú)菌管收集,。離心20分鐘左右2000-3000轉(zhuǎn)/分。仔細(xì)收集上清,。保存過(guò)程中如有沉淀形成,，應(yīng)再次離心。胸腹水,、腦脊液參照此實(shí)行,。
4細(xì)胞培養(yǎng)上清：
檢測(cè)分泌性的成份時(shí)，用無(wú)菌管收集,。離心20分鐘左右2000-3000轉(zhuǎn)/分,。仔細(xì)收集上清。
5培養(yǎng)細(xì)胞
檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),，用pbsph7.2-7.4稀釋細(xì)胞懸液,，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬(wàn)/ml左右。通過(guò)反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份,。離心20分鐘左右2000-3000轉(zhuǎn)/分。仔細(xì)收集上清,。保存過(guò)程中如有沉淀形成,，應(yīng)再次離心。
6組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后,，稱取重量,。加入一定量的pbs，ph7.4,。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆�,。�?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的pbsph7.4,，或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化,。離心20分鐘左右2000-3000轉(zhuǎn)/分。仔細(xì)收集上清,。分裝后一份待檢測(cè),，其余冷凍備用。
 
注意事項(xiàng)：
1加樣：
實(shí)驗(yàn)樣本過(guò)多時(shí),，可分批次操作,，以減少實(shí)驗(yàn)時(shí)間延長(zhǎng)造成的誤差；
加酶試劑后,，用吸水紙吸干孔外試劑,；
作定量試驗(yàn)時(shí),，使用加樣器加注試劑，并經(jīng)常校正其準(zhǔn)確性,，此外,，要做到一份樣本一個(gè)移液頭，防止交叉污染,。
2.溫育：
如有兩種溫度,，盡量使用較低的溫育溫度、較長(zhǎng)反應(yīng)時(shí)間的條件,；
用1個(gè)小溫度計(jì)放置在板孔反應(yīng)液中測(cè)量觀察,；
96孔板周圍孔與中心孔在溫育中的熱力學(xué)梯度會(huì)造成“邊緣效應(yīng)”，因此盡量采用水�,�,；
3.洗板：
手工洗板時(shí)，拍板時(shí)要垂直,，避免交叉污染,，用力不能過(guò)猛，防止抗原抗體復(fù)合物脫離,；
洗板機(jī)洗板時(shí)應(yīng)經(jīng)常檢查沖洗頭是否通暢,，若被雜物堵塞時(shí)可用-針頭挑出；
為了洗滌效果好,，實(shí)驗(yàn)室可采用機(jī)器與人工洗滌相結(jié)合的方法,，在機(jī)器洗滌后再進(jìn)行人工洗板1-2次，或適當(dāng)增加洗板的次數(shù),；
 
實(shí)驗(yàn)流程:

猴-白h elisa試劑盒1.實(shí)驗(yàn)前標(biāo)準(zhǔn)品,、試劑及樣本的準(zhǔn)備；
2.加樣標(biāo)準(zhǔn)品及樣本50μl,，37℃孵育30分鐘,；
3.洗板5次，加酶標(biāo)試劑50ul,，37℃孵育半小時(shí),；
4.洗板5次；加入顯色液a,，b各50ul,37℃孵育顯色15分鐘
5.加終止液50μl,，立即450nm讀數(shù)。
6.計(jì)算


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