上海谷研實業(yè)有限公司為您提供質(zhì)型多角體-探針法熒光定量pcr試劑盒,。
上海谷研實業(yè)有限公司為您提供質(zhì)型多角體---探針法熒光定量pcr試劑盒,。
它具有下列特點:
1. 即開即用,,用戶只需要提供樣品rna模板。
2. 引物和探針經(jīng)過優(yōu)化,,靈敏性高,。
3. 提供陽性對照,便于區(qū)分假陰性樣品,。
4. 特---高,,引物是根據(jù)傘枝梨頭霉高度保守區(qū)設(shè)計,不會跟其他---的rna發(fā)生交叉反應(yīng),。
5. 本產(chǎn)品足夠 50 次 20μl 體系的探針法熒光定量 rt-pcr 反應(yīng),。
6. 本產(chǎn)品只能用于科研。
熒光定量pcr服務(wù):
簡介:質(zhì)型多角體---探針法熒光定量pcr試劑盒實時熒光定量pcr技術(shù)于1996年由美國applied biosystems公司推出,,該技術(shù)不僅實現(xiàn)了pcr從定性到定量的飛躍,,而且與常規(guī)pcr相比,它具有特------,、有效解決pcr污染問題,、自動化程度---特點,目前該技術(shù)已被廣泛用于檢測細(xì)胞mrna表達(dá)量的變化,;比較不同組織的mrna表達(dá)差異,;驗證基因芯片,sirna干擾的實驗結(jié)果等,。我公司為您提供全套實時熒光定量pcr技術(shù)服務(wù),,全部實驗皆使用進(jìn)口試劑完成,主要定量pcr儀器,。1,、熒光定量pcr服務(wù)要求:
01請您提供新鮮的且盡量多的材料;或直接提供純化好的總rna大于 5 ug/樣品,;或直接提供純化好的dna大于 5 ug/樣品,。
02請?zhí)峁┮阎娜L基因序列。
03請?zhí)峁┍M可能詳細(xì)的背景資料:dna/rna 來源等
2,、熒光定量pcr操作程序
01引物探針設(shè)計與合成,。
02提取dna/rna,樣本逆轉(zhuǎn)錄成cdna,。
03進(jìn)行real time pcr實驗,,進(jìn)行實驗結(jié)果分析。
04實驗完成后,,提供完整的實驗報告含軟件分析結(jié)果及引物等實驗材料,。
pcr實驗方法步驟:
質(zhì)型多角體---探針法熒光定量pcr試劑盒方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×pcr buffer
5 μl dntp mix 2mm
4 μl 引物110pm
2 μl 引物210pm
2 μl taq酶 2u/μl
1 μl dna模板50ng-1μg/μl
1 μl 加ddh2o至 50 μl
視pcr儀有無熱蓋,,不加或添加石蠟油,。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,,立即置pcr儀上,,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s *** 58℃ 30s *** 72℃ 60s,,循環(huán)30-35次,在72℃ 保溫7min,。
3:傘枝梨頭霉探針法熒光定量pcr試劑盒結(jié)束反應(yīng),,pcr產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存,。
4:pcr的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,,需用100μl氯仿進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油,;否則,,直接取5-10μl電泳檢測。
河豚魚源性成分探針法熒光定量pcr試劑盒
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