上海谷研實(shí)業(yè)有限公司為您提供新-弗朗西斯菌探針法熒光定量pcr試劑盒。上海谷研實(shí)業(yè)有限公司為您提供新-弗朗西斯菌探針法熒光定量pcr試劑盒,。
它具有下列特點(diǎn)：

1. 即開即用,，用戶只需要提供樣品rna模板。2. 引物和探針經(jīng)過優(yōu)化,，靈敏性高,。
3. 提供陽性對(duì)照，便于區(qū)分假陰性樣品,。
4. 特---高,，引物是根據(jù)傘枝梨頭霉高度保守區(qū)設(shè)計(jì)，不會(huì)跟其他---的rna發(fā)生交叉反應(yīng)。
5. 本產(chǎn)品足夠 50 次 20μl 體系的探針法熒光定量 rt-pcr 反應(yīng),。

6. 本產(chǎn)品只能用于科研,。

熒光定量pcr服務(wù)：


簡(jiǎn)介：新-弗朗西斯菌探針法熒光定量pcr試劑盒說明書實(shí)時(shí)熒光定量pcr技術(shù)于1996年由美國(guó)applied biosystems公司推出，該技術(shù)不僅實(shí)現(xiàn)了pcr從定性到定量的飛躍,，而且與常規(guī)pcr相比,，它具有特------、有效解決pcr污染問題,、自動(dòng)化程度---特點(diǎn),，目前該技術(shù)已被廣泛用于檢測(cè)細(xì)胞mrna表達(dá)量的變化；比較不同組織的mrna表達(dá)差異,；驗(yàn)證基因芯片,，sirna干擾的實(shí)驗(yàn)結(jié)果等。我公司為您提供全套實(shí)時(shí)熒光定量pcr技術(shù)服務(wù),，全部實(shí)驗(yàn)皆使用進(jìn)口試劑完成,，主要定量pcr儀器。1,、熒光定量pcr服務(wù)要求：
01請(qǐng)您提供新鮮的且盡量多的材料,；或直接提供純化好的總rna大于 5 ug/樣品；或直接提供純化好的dna大于 5 ug/樣品,。
02請(qǐng)?zhí)峁┮阎�的全長(zhǎng)基因序列,。
03請(qǐng)?zhí)峁┍M可能詳細(xì)的背景資料：dna/rna 來源等
2、熒光定量pcr操作程序
01引物探針設(shè)計(jì)與合成,。
02提取dna/rna,，樣本逆轉(zhuǎn)錄成cdna。
03進(jìn)行real time pcr實(shí)驗(yàn),，進(jìn)行實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析,。
04實(shí)驗(yàn)完成后，提供完整的實(shí)驗(yàn)報(bào)告含軟件分析結(jié)果及引物等實(shí)驗(yàn)材料,。
pcr實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中,，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     
10×pcr buffer                   
5 μl     dntp mix 2mm             
4 μl     引物110pm                 
2 μl     引物210pm                 
2 μl     taq酶 2u/μl               
1 μl     dna模板50ng-1μg/μl
1 μl      加ddh2o至 50 μl
新-弗朗西斯菌探針法熒光定量pcr試劑盒說明書視pcr儀有無熱蓋,，不加或添加石蠟油,。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,，立即置pcr儀上,，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min,，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s *** 58℃ 30s *** 72℃ 60s,，循環(huán)30-35次,，在72℃ 保溫7min,。
3：傘枝梨頭霉探針法熒光定量pcr試劑盒結(jié)束反應(yīng),，pcr產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4：pcr的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油,，需用100μl氯仿進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,，以除去石蠟油；否則,，直接取5-10μl電泳檢測(cè),。
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