透射電鏡觀察:可見凋亡細(xì)胞表面微絨毛消失,核染色質(zhì)固縮、邊.集,,常呈新月形,,核膜皺褶,,胞質(zhì)緊實(shí),細(xì)胞器集中,,胞膜起泡或出“芽”及凋亡小體和調(diào)亡小體被臨近巨噬細(xì)胞吞噬現(xiàn)象,。
結(jié)果評判:調(diào)亡細(xì)胞體積變小,流式細(xì)胞檢測,,細(xì)胞質(zhì)濃縮,。調(diào)亡i期( pro-apoptosis nuclei)的細(xì)胞核內(nèi)染色---度盤繞,出現(xiàn)許多稱為氣穴現(xiàn)象( cavitati)的空泡結(jié)構(gòu); iia 期細(xì)胞核的染色---度凝聚,、邊緣化;細(xì)胞凋亡的晚期,,細(xì)胞核裂解為碎塊,轉(zhuǎn)染,,產(chǎn)生調(diào)亡小體,。
q:如何避免中沉淀物的出現(xiàn)?
a:首先要注意正確的解凍步驟,,而且溶解過程中一定要每隔一段時(shí)間均勻而緩慢的搖動(dòng),。我們已經(jīng)發(fā)現(xiàn)在下列情況下沉淀物可能增加,樂山細(xì)胞,,使用中應(yīng)該盡量避免:
1熱滅活,;
2在 37℃ 下培養(yǎng);
3反復(fù)凍融,;
4γ 射線照射;
5長期儲(chǔ)存在 2-8℃,;
6在室溫下放置時(shí)間過長
q:如何去除中的沉淀,?
a:如想去除這些絮狀沉淀物,可以將分裝到無菌離心管中,,以 400g 離心,,上清液即可直接加入到培養(yǎng)基 內(nèi)一起過濾。
注意:不要以過濾的方式去除這些絮狀沉淀物,,因?yàn)檫@可能阻塞濾膜,。
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---是指同一來源的細(xì)胞逐漸產(chǎn)生出形態(tài)結(jié)構(gòu)、功能特征各不相同的細(xì)胞類群的過程,,其結(jié)果是在空間上細(xì)胞產(chǎn)生差異,,在時(shí)間上同一細(xì)胞與其從前的狀態(tài)有所不同。---的本質(zhì)是基因組在時(shí)間和空間上的選擇性表達(dá),,通過不同基因表達(dá)的開啟或關(guān)閉,,終產(chǎn)生---蛋白質(zhì),。細(xì)胞---是指將一群不同類型或者形態(tài)結(jié)構(gòu)、功能特征存在差異的細(xì)胞通過生物學(xué),、物理學(xué)等手段,,將之轉(zhuǎn)變?yōu)榫哂邢嗨?相同形態(tài)結(jié)構(gòu)、功能特征的細(xì)胞群體的過程,。
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