單核苷酸多態(tài)性( snp )實驗

snp (single nucleotide polymorphisn即單核苷酸多態(tài)性 ,，是由于單個核苷酸改變而導(dǎo)致的-序列多態(tài)性(polymorphism),。據(jù)估計,，pcr實驗室，在人類基因組中,，攀枝花pcr,，大約每千個堿基中有一個snp ，無論是比較于度多態(tài)性(rflp)分析還是微標(biāo)記(str) ,，都要廣泛得多,。

實驗方法原理:

snp (single nucleotide polymorphisn即單核苷酸多態(tài)性，是由于單個核苷酸改變而導(dǎo)致的-序列多態(tài)性(polymorphism),。據(jù)估計，在人類基因組中,，大約每千個堿基中有一個snp ,，pcr，無論是比較于-性段長度多態(tài)性(rflp)分析還是微標(biāo)記(str) ,，都要廣泛得多,。snp是我們考察遺傳變異的單位，實時定量pcr,，據(jù)估計,，人類的所有群體中大約存在一千萬個snp位點。-般認(rèn)為,，相鄰的snps傾向于一起遺傳給后代,。 于是，我們把位于染色體上某一區(qū)域的一組相關(guān)聯(lián)的snp等位位點稱作單體型( haplotype b大多數(shù)染色體區(qū)域只有少數(shù)幾個常見的單體型(每個具有至少5%的頻率),，它們代表了一個群體中人與人之間的大部分多態(tài)性,。-個染色體區(qū)域可以有很多snp位點，但是我們一-旦掌握了這個區(qū)域的單體型,，就可以只使用少數(shù)幾個標(biāo)簽snps(tagsnp)來進行基因分型,，獲取大部分的遺傳多態(tài)模式。

mirna測序

microrna(mirna)是一種大小約21—23個堿基的單鏈小分子rna,，是由具有發(fā)夾結(jié)構(gòu)的約70-90個堿基大小的單鏈rna前體經(jīng)過dicer酶加工后生成,，不同于sirna雙鏈但是和sirna密切相關(guān)。microrna通過和靶基因mrna堿基配對引導(dǎo)沉默復(fù)合體risc降解mrna或抑制mrna的翻譯,，從而在轉(zhuǎn)錄后水平調(diào)控蛋白表達新發(fā)現(xiàn)mirna也能在轉(zhuǎn)錄水平調(diào)控基因表達,。mirna在物種進化中相當(dāng)保守，在動物,、植物和-等中發(fā)現(xiàn)的mirna表達均有嚴(yán)格的組織特-和時序性,。mirna在細(xì)胞生長和發(fā)育過程中起多種作用，包括調(diào)控發(fā)育,、分化,、凋亡和增殖等,。

目前研究mirna的方法主要是realtime-pcr、生物芯片技術(shù)以及第二代測序技術(shù),�,；�于第二代測序技術(shù)的mirna測序，可以一次獲得數(shù)百萬條mirna序列,，能夠快速鑒定出不同組織,、不同發(fā)育階段、不同-狀態(tài)下已知和未知的mirna及其表達差異,，為研究mirna對細(xì)胞進程的作用及其生物學(xué)影響提供了有力工具,。