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薄層色譜,,分離后的物質(zhì)通過(guò)直接觀察,或者染色處理后觀察,,或者在紫外燈照射下觀察,。其中紫外照射熒光觀察是常用的方法。但是薄層色譜法具有操作簡(jiǎn)單,、快速,,設(shè)備投資小,、檢測(cè)運(yùn)行成本低等特點(diǎn),,在各領(lǐng)域得到廣泛應(yīng)用。
薄層色譜掃描儀是對(duì)薄層色譜進(jìn)行定量檢測(cè)分析的儀器,,當(dāng)前市場(chǎng)上有兩類薄層色譜掃描儀。
理想的顯色希望靈敏度高,斑點(diǎn)顏色穩(wěn)定,、斑點(diǎn)與背景間的對(duì)比度好,,斑點(diǎn)的大小及顏色的-與物質(zhì)的量成正比,在樣品組成并不完全已知的情況下,通用顯色方法顯得尤為重要,,放射性薄層掃描儀生產(chǎn)廠家,,通用顯色方法主要有:
1、紫外照射法:方便,、不破壞樣品;
2,、碘蒸氣法:通用性強(qiáng),與紫外法結(jié)合靈敏度高于該兩法單獨(dú)使用;
3、熒光試劑:制造熒光背景,,使原來(lái)紫外下無(wú)熒光物質(zhì)被鑒別,有熒光物質(zhì)更明顯,;
4,、---溶劑:對(duì)絕大多數(shù)有機(jī)物有效,但有破壞性,。
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怎樣提高點(diǎn)樣效率,?
點(diǎn)樣是造成tlc定量誤差的主要來(lái)源,。實(shí)驗(yàn)證明:定量毛細(xì)管更適合較小體積的點(diǎn)樣,;微量注1射器更適合較大體積的點(diǎn)樣。這主要是因?yàn)槲⒘孔?射器受小氣泡,、溶液回爬現(xiàn)象的影響較大,。為避免不同定量毛細(xì)管理體制的占樣誤差,建議一塊薄層板上用同一只定量毛細(xì)管,。
在制備樣品時(shí),,溶樣溶劑黏度不能過(guò)高,以便于點(diǎn)樣,;溶劑沸點(diǎn)過(guò)低則進(jìn)樣體積易變,,過(guò)高則會(huì)改變展開劑組成;對(duì)樣品溶解度過(guò)高會(huì)使樣點(diǎn)發(fā)生空心現(xiàn)象,。-tlc樣點(diǎn)---一般為直徑3mm點(diǎn)間距離1-2cm底邊距離1.5cm,;hplc樣點(diǎn)---一般為直徑1mm點(diǎn)間距5mm底邊距1cm。
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