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一水檸檬酸發(fā)酵機(jī)理

1940年h.a.克雷伯斯提出三羧循環(huán)學(xué)說(shuō)以來(lái),，一水檸檬酸的發(fā)酵機(jī)理逐漸被人們所認(rèn)識(shí)。已經(jīng)證明,，糖質(zhì)原料生成一水檸檬酸的生化過(guò)程中,，由糖變成酸的過(guò)程與酒精發(fā)酵相同，亦即通過(guò)e-m途徑二磷酸己糖途徑進(jìn)行酵解,。然后酸進(jìn)一步氧化脫羧生成---輔酶a,，---輔酶a和酸羧化所生成的草酰縮合成為一水檸檬酸并進(jìn)入三羧循環(huán)途徑,。

一水檸檬酸是代謝過(guò)程中的中間產(chǎn)物,。在發(fā)酵過(guò)程中，當(dāng)微生物體內(nèi)的烏頭酸水合酶和異一水檸檬酸脫氫酶活性很低,、而一水檸檬酸合成酶活性-時(shí),，才有利于一水檸檬酸的大量積累,。

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   一水檸檬酸是---生產(chǎn)的重要原料，對(duì)要求十分嚴(yán)格,。文獻(xiàn)n弛,。采用火焰原子吸收法同時(shí)測(cè)定一水檸檬酸中微量的鉛、鐵和鈣,。本法采用wyx一406型原子吸收光譜儀．相應(yīng)元素的空心陰極燈，燈電流：pbl．4ma,，fe2．4ma,，cal．4ma。光譜通帶0．2nm,；燃助比1：4,。采用標(biāo)準(zhǔn)曲線法或標(biāo)準(zhǔn)加入法測(cè)定。

   在測(cè)定中可采用直接法,，即準(zhǔn)確稱取一水檸檬酸5．0000g于100ml燒杯中,，加適量水溶解后移入100ml容量瓶中，加水至刻度,，搖勻,，分別與混合標(biāo)準(zhǔn)溶液系列同時(shí)測(cè)定,。

   采用標(biāo)準(zhǔn)加入法，即準(zhǔn)確稱取一水檸檬酸5．0000g三份于3個(gè)100ml燒杯中,，加適量水溶解后移入100ml容量瓶中,，分別加入一定量的鉛、鐵和鈣,，然后加水定容,，待測(cè)。

   檸檬酸是有機(jī)酸,，為證實(shí)溶液中有機(jī)質(zhì)對(duì)測(cè)定的影響,，采用濕法灰化法．即準(zhǔn)確稱取一水檸檬酸2．5000g子100ml瓷坩堝中，加入5ml 2mol／l硝1酸,，在電爐上緩慢加熱．待炭化完全后,，移入550 ℃高溫爐中灰化�,；一�后滴加��(shù)滴(1+1)硝1酸以溶解灰份,，然后移入50ml容量瓶中，用水定容稀釋至刻度,，同時(shí)作試劑空白試驗(yàn),。與混合標(biāo)準(zhǔn)溶液系列同時(shí)進(jìn)行測(cè)定。試驗(yàn)表明三種測(cè)定方法的結(jié)果一致,，而直接法快速,，經(jīng)濟(jì)。

   干擾試驗(yàn)表明,，試樣中氯離子,，---根離子，草酸根離子和鉛,、鐵,、鈣等離子的含量均低于100pg／ml，均不干擾鉛,、鐵,、鈣的測(cè)定。

   本法回收率：鉛101．9％～110．3%,；鐵95．8％～99％,；鈣96％～100％．相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差則為1．6％～10．2％。

   為了消除共存元素對(duì)鈣測(cè)定的干擾,，通常加入10％硝1酸---作釋放劑,。在檸檬酸試樣加---鹽和不加---鹽的測(cè)定結(jié)果，未發(fā)現(xiàn)鈣的消光度有明顯變化,，說(shuō)明試樣中不含poi干擾組分,。

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