低溫研磨樣品能夠有效抑制---降解、保留蛋白質(zhì)活性,。
·分析藥的成分
藥的有效成分的異構(gòu)體之間常常存在重大區(qū)別,。低溫研磨可預(yù)防分子因壓力和受熱而降解。
·減少樣品揮發(fā)
低溫研磨能---減少樣品的揮發(fā),，更完整保留樣品成分含量
·研磨韌性/硬性樣品
對于高韌塑料,、高強塑料、樹脂等難研磨樣品,，低溫研磨可---提高研磨效果及效率
每50～100mg 組織加入0.2體積 trizol
1.加鋼球1顆,，設(shè)置研磨儀參數(shù)：12單位振頻,，1min，每種樣品基本充分勻漿
2. 將上述勻漿液每0.2體積 trizol 試劑用量的勻漿液中加入0.04體積氯方,，蓋緊管蓋,，手動劇烈震搖15 秒鐘，然后室溫靜置2～3 分鐘,。
3. 4℃ 10,，000g 離心10 分鐘。
4. 小心吸取上層水相無色加入到新試管中,，同時計算所吸取的水相體積,。不必過多吸取，防止吸入dna和蛋白雜質(zhì)中間層,，白色,。
5. 加入所吸取水相等體積預(yù)冷的---淳,，蓋緊管蓋，輕輕搖勻,。
6. 室溫靜置10 分鐘,，待rna 充分沉淀為減少rna 降解，此步驟可省略,。
7. 4℃ 10,，000g 離心10 分鐘。
8. 將上清棄除注意別丟棄沉淀,，每管加入0.2體積75%---潤洗,，蓋緊管蓋，輕輕晃動試管,，以去除殘留的---淳和鹽份,。4℃ 7，500g 離心5 分鐘,。
9. 將上清棄除注意別丟棄沉淀,，打開管蓋，將rna 沉淀干燥室溫?fù)]發(fā)或真空干燥,。注意rna 沉淀不可完全干燥，否則難以溶解,。
10. 將rna 沉淀溶解于適量的無rnase 水中,。如果rna 沉淀溶解不完全，將使od260/od280≤1.6,。此rna 溶液可用于進一步實驗,，或者-70℃保存。
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