北京博爾西科技有限公司為您提供蛋白a瓊脂糖凝膠ff。提示：本公司全部產(chǎn)品均為科研實(shí)驗(yàn)使用試劑,，非---用途,、非食品,、非體外診斷試劑,，不可用于動(dòng)物及人體,！
重組蛋白a-瓊脂糖凝膠ff
protein a berpharose ff
1.產(chǎn)品介紹
重組蛋白a瓊脂糖凝膠ffprotein a berpharose ff親和介質(zhì)以自制的瓊脂糖凝膠為基質(zhì),，以重組蛋白arprotein a為配基,，具有---的物理化學(xué)穩(wěn)定性,，配基不易脫落,，---，使用方便,，應(yīng)用廣泛,。蛋白aprotein a能特---地與抗體igg分子的fc區(qū)結(jié)合，所以protein a親和介質(zhì)可用于抗體單抗和多抗的分離純化,，經(jīng)過一步親和層析,，即可從腹水、血清和培養(yǎng)液等樣品中得到高純度的抗體,。
2.規(guī)格
1ml預(yù)裝柱,、5ml預(yù)裝柱、10ml預(yù)裝柱,、25ml,、100ml、500ml,、1l
3.產(chǎn)品性能
性能 指標(biāo)
基質(zhì) 4%瓊脂糖微球
配基 重組蛋白a
配基密度 >6mg/ml
載量 ***35mg人igg /ml
粒徑 45-165μm
---耐壓 0.3mpa
---流速 50-300 cm/h
ph穩(wěn)定范圍-工作/清洗 3~9/3~10
儲(chǔ)存緩沖液 20%---
儲(chǔ)存溫度 4-8℃
4. igg與蛋白ag結(jié)合強(qiáng)度比較
種類 亞類 蛋白a 蛋白g 蛋白a蛋白g融合蛋白
人 igg1 +++ +++ +++
igg2 +++ +++ +++
igg3 + +++ +++
igg4 +++ +++ +++
igm + - +
igd - - -
iga + - +
fab + + +
兔 igg +++ ++ +++
山羊 igg1 + +++ +++
igg2 +++ +++ +++
牛 igg1 + +++ +++
igg2 +++ +++ +++
小鼠 igg1 + +++ ++
igg2a +++ +++ +++
igg2b +++ +++ +++
igg3 ++ +++ +++
igm - - -
大鼠 igg1 + ++ ++
igg2a - +++ +++
igg2b - + +
igg2c +++ +++ +++
豬 igg +++ ++ +++
犬 igg +++ + +++
雞 igy - - -
馬 iggab + ++ +
iggc + ++ +
5.純化流程
應(yīng)用舉例：
結(jié)合緩沖液：20 mm磷酸緩沖液,，150 mm nacl，ph 7.0
洗脫緩沖液：0.1m甘氨酸,，ph3.0或0.1m檸檬酸緩沖液,，ph 4.0
中和緩沖液：1 m tris-hcl，ph 8.5
1) 1 ml重組蛋白a瓊脂糖凝膠預(yù)填柱用5-10個(gè)柱床體積的蒸餾水洗去保存液,。
2)用結(jié)合緩沖液結(jié)合緩沖液平衡5-10個(gè)柱床體積,。
3)將5 ml人多抗血清用結(jié)合緩沖液稀釋到50ml，0.45μm濾膜過濾上樣,。
4)用結(jié)合緩沖液再洗5-10個(gè)柱床體積,。
5)用洗脫緩沖液洗脫抗體，收集洗脫峰,，并用中和緩沖液調(diào)節(jié)其ph至中性,。
6)每次使用后依次使用3個(gè)柱體積的結(jié)合緩沖液，5個(gè)柱體積的去離子水,， 5 個(gè)柱體積的 20%的---平衡保存,，防止填料被---污染,。
7) sds-page電泳分析。
6.注意事項(xiàng)：
1)樣品洗脫后一般ph很低,，應(yīng)---用堿性中和緩沖液如1mtris-hcl,，ph8.5將收集到的抗體溶液中和到中性，或在收集容器中事先裝5-10%,、ph7.5的緩沖液如1mtris-hcl或1m磷酸緩沖液,，以利于維持抗體的生物活性，避免抗體失活,。
2)使用時(shí)---柱子和緩沖液的溫度一致,，避免柱床內(nèi)產(chǎn)生氣泡，影響純化效果,。
3)填料再生清洗：隨著一些變性物質(zhì)的沉淀和蛋白的---,，往往造成流速和結(jié)合載量下降，---影響純化效果,，這時(shí)需要對填料進(jìn)行再生清洗如下步驟
去除沉淀或變性物質(zhì)：用 2 倍柱體積的 6m ---胍溶液進(jìn)行清洗,，然后立即用 5 倍柱體積的 pbs, ph 7.4 清洗。
去除疏水性吸附造成的非特---吸附物質(zhì)：用 3-4 倍柱體積的 70%---或 2 倍柱體積的 1% triton x-100 清洗,，然后然后立即用 5倍柱體積的 pbs, ph 7.4 清洗
4)本產(chǎn)品保存條件：20%---,，4~8℃。
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