1.進口抗體-------、靈敏,、特異
2.操作----吸附均勻,,吸附性好,空白值低,,孔底透明度高
3.---的優(yōu)化方案----重復(fù)性高,,---性強
4.購買本公司的elisa試劑盒,免費代測
5.技術(shù)服務(wù)要求:,,規(guī)范,,---
6.適用于---、組織勻漿液,、細胞培養(yǎng)上清液,、尿液等多種類型的樣本
7.可檢測動物類型豐富:人、猴,、大鼠,、小鼠、---,、黃金地鼠,、兔、豬,、犬,、牛、綿羊,、山羊,、鵝、雞,、蝦,、河蟹、鱸魚,、斑馬魚等
8.可檢測指標(biāo)齊全:---因子,、血管生成素,、動脈粥樣硬化因子、趨化因子,、生長因子基質(zhì)金屬蛋白酶,、脂肪因子等等
9.經(jīng)濟、實惠,、---,,完善、穩(wěn)定的實驗體系,,---的科研隊伍,,---的實驗設(shè)備、準(zhǔn)確---的實驗結(jié)果
elisa試劑盒液體樣本:包括血清,、血漿、尿液,、胸腹水,、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清等,。
1血清
室溫---自然凝固10-20分鐘后,,離心20分鐘左右2000-3000轉(zhuǎn)/分。仔細收集上清,。保存過程中如有沉淀形成,,應(yīng)再次離心。
2血漿:
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇edta,、檸檬酸鈉或---作為抗凝劑,,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右2000-3000轉(zhuǎn)/分,。仔細收集上清,。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心,。
3尿液:
用無菌管收集,。離心20分鐘左右2000-3000轉(zhuǎn)/分。仔細收集上清,。保存過程中如有沉淀形成,,應(yīng)再次離心。胸腹水,、腦脊液參照此實行,。
4細胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集,。離心20分鐘左右2000-3000轉(zhuǎn)/分,。仔細收集上清,。
5培養(yǎng)細胞
檢測細胞內(nèi)的成份時,用pbsph7.2-7.4稀釋細胞懸液,,細胞濃度達到100萬/ml左右,。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份,。離心20分鐘左右2000-3000轉(zhuǎn)/分,。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,,應(yīng)再次離心,。
6組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后,稱取重量,。加入一定量的pbs,,ph7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆�,。�?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度,。加入一定量的pbsph7.4,或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化,。離心20分鐘左右2000-3000轉(zhuǎn)/分,。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,,其余冷凍備用,。
1加樣:
實驗樣本過多時,可分批次操作,,以減少實驗時間延長造成的誤差,;
加酶試劑后,用吸水紙吸干孔外試劑,;
作定量試驗時,,使用加樣器加注試劑,并經(jīng)常校正其準(zhǔn)確性,,此外,,要做到一份樣本一個移液頭,防止交叉污染,。
2.溫育:
如有兩種溫度,,盡量使用較低的溫育溫度、較長反應(yīng)時間的條件,;
用1個小溫度計放置在板孔反應(yīng)液中測量觀察,;
96孔板周圍孔與中心孔在溫育中的熱力學(xué)梯度會造成“邊緣效應(yīng)”,因此盡量采用水�,�,;
3.洗板:
手工洗板時,,拍板時要垂直,避免交叉污染,,用力不能過猛,,防止抗原抗體復(fù)合物脫離;
洗板機洗板時應(yīng)經(jīng)常檢查沖洗頭是否通暢,,若被雜物堵塞時可用-針頭挑出,;
為了洗滌效果好,實驗室可采用機器與人工洗滌相結(jié)合的方法,,在機器洗滌后再進行人工洗板1-2次,,或適當(dāng)增加洗板的次數(shù);
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2.加樣標(biāo)準(zhǔn)品及樣本50μl,37℃孵育30分鐘,;
3.洗板5次,,加酶標(biāo)試劑50ul,37℃孵育半小時,;
4.洗板5次;加入顯色液a,,b各50ul,37℃孵育顯色15分鐘
5.加終止液50μl,,立即450nm讀數(shù)。
6.計算
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