上海谷研實(shí)業(yè)有限公司為您提供荷斯坦奶牛胎兒成纖維細(xì)胞。

資源名稱 荷斯坦奶牛胎兒成纖維細(xì)胞

種屬:humancellline1d3
形態(tài):成纖維細(xì)胞樣
培養(yǎng)方法
培養(yǎng)基:mem-ebss:minimumessentialmedium(memeagleswithearle＇sbalancedsalts)10%fbs
生長(zhǎng)特性:貼壁生長(zhǎng)

培養(yǎng)操作步驟 ：

1．荷斯坦奶牛胎兒成纖維細(xì)胞用蓋片鑷將蓋,，用無(wú)菌絲綢布擦拭干凈,，不要用紗布；
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板每孔一片或培養(yǎng)皿中每個(gè)平皿可放置2-3片,；
3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí),；
4．將經(jīng)過(guò)計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片完全浸在培養(yǎng)液中,；
5．將培養(yǎng)板在5% co2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,，當(dāng)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí)，將培養(yǎng)板取出,，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,，用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及---化學(xué)檢測(cè),。

實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說(shuō)明：
1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),，懸浮細(xì)胞可使用滴片法,；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為---玻璃制造，并經(jīng)過(guò)---洗液處理,；
3．蓋玻片非常薄,，易碎，取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕,；
4．如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞,，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過(guò)大,，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率,；
5．如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干,。
細(xì)胞培養(yǎng)方法：
1,、細(xì)胞傳代：細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時(shí)即可傳代
棄去培養(yǎng)上清，用pbs或生理鹽水清洗1-2次,；
加入2ml0.25%胰酶t25瓶,，使胰酶覆蓋整個(gè)瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱---,；
1-2min后,，顯微鏡下觀察細(xì)胞，若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,，輕輕吹打下確認(rèn)---情況后加入完全培養(yǎng)基終止---,；若細(xì)胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)---至可以輕輕吹打下為止,；
將細(xì)胞懸液1000rpm左右條件下離心4min,，棄上清；
用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,，t25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基,；
懸浮細(xì)胞直接離心收集，細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中,。
2,、細(xì)胞復(fù)蘇：
將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時(shí)間1min左右,，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻,。
在1000rpm左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,，補(bǔ)加適量培養(yǎng)基,。
3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)---時(shí)進(jìn)行細(xì)胞凍存保種
棄去培養(yǎng)上清,，用pbs或生理鹽水清洗1-2次,，加入1ml 0.25%胰蛋白酶t25瓶
1-2min后，顯微鏡下觀察細(xì)胞,，大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,，輕輕吹打下確認(rèn)---情況后加入完全培養(yǎng)基終止---；
將細(xì)胞懸液1000rpm左右條件下離心4min,，棄上清,，加1ml凍存液重懸細(xì)胞；
將凍存管放入程序降溫盒,，放入-80℃冰箱,，4小時(shí)后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲(chǔ)存。

公司細(xì)胞荷斯坦奶牛胎兒成纖維細(xì)胞廣泛用于國(guó)內(nèi)院校的細(xì)胞生物學(xué)研究,，作為實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目研究

細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn)：

1.研究的對(duì)象是細(xì)胞,。
在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力,，并可長(zhǎng)時(shí)間監(jiān)控,、檢測(cè)甚至定量評(píng)估一部分細(xì)胞的情況，包括細(xì)胞的形態(tài),、結(jié)構(gòu),、生命活動(dòng)等。
2.研究條件可以人為控制
ph,、溫度,、氧氣、---,、張力等物理化學(xué)的條件,，可以根據(jù)實(shí)際需要進(jìn)行人為的控制，同時(shí),，可以施加化學(xué),、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實(shí)驗(yàn)觀察,，這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下,。
3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性
通過(guò)細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后,，所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類(lèi)型的細(xì)胞,，需要時(shí)，可采用---化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。
4.研究?jī)?nèi)容便于觀察,、檢測(cè)和記錄
采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡,、熒光顯微鏡、電子顯微鏡,、流式細(xì)胞術(shù),、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學(xué),、原位雜交,、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備。

1規(guī)格：hplc***98%,，標(biāo)準(zhǔn)品 porcineheatshockprotein20,hsp-20elisa試劑盒豬熱化蛋白20(hsp-20)elisa試劑盒規(guī)格：96t/48t
雷酚內(nèi)酯標(biāo)準(zhǔn)品 triptophenolide 規(guī)格：hplc***99%,，標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠---化物酶體增殖因子活化受體γ( ppar-γ)elisa 試劑盒 96t/48t 試劑盒 組裝/
雷公藤紅素(標(biāo)準(zhǔn)品) celastrol 規(guī)格：hplc***98%，標(biāo)準(zhǔn)品 rat immunoglobulin a (iga) elisa kit 大鼠球蛋白a(iga)elisa試劑盒
雷公藤甲素(標(biāo)準(zhǔn)品) triptolide 規(guī)格：hplc***98%,，標(biāo)準(zhǔn)品 humanprostaglandine1,pg-e1elisakit 人化素e1(pge1)elisa試劑盒 96t/48t 進(jìn)口分裝
雷公藤內(nèi)酯酮標(biāo)準(zhǔn)品 triptonide 規(guī)格：hplc***98%,，標(biāo)準(zhǔn)品 humanai-parotidductaibodyelisa試劑盒人抗腮腺管抗體(ai-parotidductab)elisa試劑盒規(guī)格：96t/48t
類(lèi)葉升麻苷,毛蕊花糖苷標(biāo)準(zhǔn)品 acteoside 規(guī)格：hplc***98%，標(biāo)準(zhǔn)品 植物細(xì)胞壁束縛酸性蔗糖轉(zhuǎn)化酶(acidinvease)活性比色-量檢測(cè)試劑盒(胞壁)20
利卡靈-b(標(biāo)準(zhǔn)品) (-)-licarin b 規(guī)格：hplc***98%,，標(biāo)準(zhǔn)品 humayrosinekinasewithimmunoglobulin-likeandegf-likedomains1,tie1elisakit人血管生成素受體/含球蛋白樣環(huán)和上皮生長(zhǎng)因子樣域酪氨酸激酶1(tie1)elisa試劑盒規(guī)格：96t/48t
利血平(標(biāo)準(zhǔn)品) reserpine 規(guī)格：hplc***98%,，標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠---化物酶體增殖因子活化受體β(ppar-β)elisa試劑盒 ，英文名： ppar-β elisa kit
和厚樸酚 honokiol 規(guī)格：***98%,br elisakitvegf-d人血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子d規(guī)格：48t/96t
素標(biāo)準(zhǔn)品

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