公司---c菌種,,
資源名稱 蘋果黑腐皮殼
種屬
分離基物 蘋果樹枝干
提供形式 斜面培養(yǎng)物
安全等級
模式菌株
培養(yǎng)方法
培養(yǎng)基
生長條件
存儲條件 定期移植法
& g. yamada
●復(fù)蘇菌種前需先準(zhǔn)備好適用于該菌生長的固體,、液體培養(yǎng)基和培養(yǎng)設(shè)備,,以形成無菌的操作環(huán)境。
●開啟之前,,先用75%酒精棉消毒試管表面,,按鋁蓋上的箭頭方向打開瓶蓋和膠塞,加入0.3ml左右的配套液體培養(yǎng)基,,用無菌滴管反復(fù)吹吸,,將凍干菌種溶解為懸液,然后用無菌滴管或接種環(huán)移至斜面,、平板或液體培養(yǎng)基,,并連同剩余菌懸液的試管一起放置于36℃培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。
●次日觀察菌種的生長情況,,如未生長,,應(yīng)繼續(xù)培養(yǎng)24h,或吸取培養(yǎng)之后的試管剩余菌懸液再次接種培養(yǎng),,培養(yǎng)24小時觀察,。
●菌株為---使用品,,暫不開啟的菌種應(yīng)在4℃環(huán)境下保存。
●復(fù)蘇后的菌種在傳1-2代以后使用,,建議菌種使用5代后棄用,。
★綜合微生物的培養(yǎng)方法,包括以下步驟:
1前期準(zhǔn)備:a處理,;b制備biolite水,;c檢查設(shè)備和材料;
2按比例配制培養(yǎng)材料,;
3導(dǎo)入曝氣,,進(jìn)行繁殖培養(yǎng),;
4取液觀察,;a取液;b稀釋菌液,;c平板培養(yǎng),;
5分離并檢測;
6取液儲存,;通過該綜合微生物培養(yǎng)方法簡單可操作性強(qiáng),,培養(yǎng)的綜合微生物均在3代以內(nèi),菌類穩(wěn)定不發(fā)生突變,,且繁殖快速,。
⑴ 孢子的制備
一般采用瓊脂斜面培養(yǎng)基,培養(yǎng)基中含有一些適合產(chǎn)孢子的營養(yǎng)成分,,如麩皮,、豌豆浸汁、蛋白胨和一些無機(jī)鹽等,。碳源和氮源不要太豐富(碳源約為1%,,氮源不超過0.5%),碳源豐富容易造成生理酸性的營養(yǎng)環(huán)境,,不利于形成,,氮源豐富則有利于菌絲繁殖而不利于孢子形成。一般情況下,,干燥和---營養(yǎng)可直接或間接---孢子形成,。面的培養(yǎng)溫度大多數(shù)為28 ℃,少數(shù)為37 ℃,,培養(yǎng)時間為5~14天,。
⑵ 霉菌孢子的制備
霉菌的孢子培養(yǎng),一般以大米,、小米,、玉米,、麩皮、麥粒等天然農(nóng)產(chǎn)品為培養(yǎng)基,。這是由于這些農(nóng)產(chǎn)品中的營養(yǎng)成分較適合霉菌的孢子繁殖,,而且這類培養(yǎng)基的表面積較大,可獲得大量的孢子,。霉菌的培養(yǎng)一般為25~28 ℃,,培養(yǎng)時間為4~14天。
⒉ 種子制備
⑴ 搖瓶種子制備
搖瓶種子進(jìn)罐,,常采用母瓶,、子瓶兩級培養(yǎng),有時母瓶種子也可以直接進(jìn)罐,。種子培養(yǎng)基要求比較豐富和完全,,并易被菌體分解利用,氮源豐富有利于菌絲生長,。原則上各種營養(yǎng)成分不宜過濃,,子瓶培養(yǎng)基濃度比母瓶略高,更接近種子罐的培養(yǎng)基配方,。
⑵ 種子罐種子制備
種子罐種子制備的工藝過程,,因菌種不同而異,一般可分為一級種子,、二級種子和---種子的制備,。孢子(或搖瓶菌絲)被接入到體積較小的種子罐中,經(jīng)培養(yǎng)后形成大量的菌絲,,這樣的種子稱為一級種子,,把一級種子轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵,稱為二級發(fā)酵,。如果將一級種子接入體積較大的種子罐內(nèi),,經(jīng)過培養(yǎng)形成更多的菌絲,這樣制備的種子稱為二級種子,,將二級種子轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵,,稱為---發(fā)酵。同樣道理,,使用---種子的發(fā)酵,,稱為四級發(fā)酵。
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