上海雅心生物技術(shù)有限公司為您提供重組腸激酶ek08雅心生物,。重組腸激酶
cat.no.: rek08
cas: 9017-74-8
ec: 3.4.21.9
儲存溫度：-20℃或以下
來源：重組牛腸激酶,，大腸桿菌表達(dá)
蛋白序列：---酸序列與牛腸激酶輕鏈一致。
1.產(chǎn)品簡介
雅心重組牛腸激酶是一種高純度的重組牛腸激酶輕鏈片段,。該酶經(jīng)hplc純化，純度高，特---高,，不含其他蛋白酶。腸激酶可以切割含有四個天冬氨酸的賴氨酸羧基端肽鍵：天冬氨酸 - 天冬氨酸 - 天冬氨酸 - 天冬氨酸 - 賴氨酸ddddk,�,？梢栽谳^寬ph范圍4.5-9.5和較寬溫度范圍內(nèi)有效切割融合蛋白。腸激酶可去除位于蛋白質(zhì)n-末端的融合蛋白,，以除去不需要的融合標(biāo)簽,。
2.產(chǎn)品特性
來源 重組大腸桿菌
外觀 澄清、無色至淡黃色液體
活性 *** 5.0 u/μl
純度蛋白電泳 單一主條帶
電泳分子量 25.8 ±2.6 kda
單位定義：1u定義為在25℃,，12h~16h之內(nèi),，將0.5mg保存于25mm tris-hcl 8.0 緩沖液中的融合蛋白切割95%所需的酶量,。
3.-使用方法
125℃酶切條件：
按照酶活性定義，酶切條件舉例：
25mm tris-hcl 8.0體系中：
融合蛋白 0.1-1mg/ml蛋白總量50-100μg
重組ek 0.1-0.2u
25℃過夜酶切,，或完全酶切需16-24h,，用sds-page
檢測酶切---。
24℃低溫酶切條件：
4℃能對底物進(jìn)行有效酶切,，但需要將酶切時間延長至48-64h,，或增加2-3倍酶量。
3酶切優(yōu)化和放大
優(yōu)化：可以對酶切條件進(jìn)行優(yōu)化,，例如緩沖液ph,，融合蛋白濃度，ek的量,，以及酶切時間,，使融合蛋白能在穩(wěn)定條件下被酶切，用sds-page檢測酶切---,。
放大：選擇優(yōu)化后的反應(yīng)條件,，按該條件等比例放大，用sds-page檢測酶切---,。
4去除重組腸激酶的方法：使用胰蛋白酶---親和層析例如sigma t0637去除重組腸激酶,。
5注意：不建議37℃條件下酶切，可能會有非特---酶切出現(xiàn),。
4.常見影響腸激酶活性的因素
在＞200mm 咪唑,，或＞200mmnacl，或＞5%甘油,，酶切---受影響,。可參照以下-方法進(jìn)行酶切：
1為獲得理想酶切結(jié)果,，請將樣品透析到25mm tris-hcl 8.0緩沖液中,，再進(jìn)行酶切。
2若不便透析,，可將樣品稀釋,，咪唑含量在100mm以下，nacl濃度在50mm以下,，甘油濃度小于5%以下進(jìn)行酶切,，酶的用量與蛋白的比例不變即1u酶切500μg蛋白。
3如果樣品溶液中含有上述成分中的一種或多種,，且不便去除,，此時適當(dāng)增加酶量或延長酶切時間，也可達(dá)到較好酶切---。
5.儲存和運(yùn)輸穩(wěn)定性
酶液儲存穩(wěn)定性：-20℃,，24個月穩(wěn)定,；25℃，一周內(nèi),，無活性損失,。緩沖體系：50mm tris-hcl，ph8.0,，250mm nacl,，2mmca2+，50%甘油,。
酶液反復(fù)凍融穩(wěn)定性：反復(fù)凍融5次,，無活性損失。
運(yùn)輸穩(wěn)定性：藍(lán)冰保溫運(yùn)輸,，穩(wěn)定,。
6.產(chǎn)品優(yōu)勢
特---：特定的蛋白酶，切割前面含有四個天冬氨酸的賴氨酸羧基端位點(diǎn)：天冬氨酸 - 天冬氨酸 - 天冬氨酸 - 天冬氨酸 - 賴氨酸 (d-d-d-d-k),。
純度高：不含其他蛋白酶，無非特---切割,。
無動物源性：重組生產(chǎn),，無外源性的---污染，生產(chǎn)過程不使用任何動物源原料,。
穩(wěn)定：批量生產(chǎn),，可-穩(wěn)定連續(xù)的批次生產(chǎn)；產(chǎn)品批次間無差異,，穩(wěn)定,。
符---規(guī)要求：生產(chǎn)設(shè)備和生產(chǎn)環(huán)境符合相關(guān)法規(guī)要求，生產(chǎn)過程完全遵循nsf iso 9001:2015體系并符合---指導(dǎo)原則,。
文件完整：按客戶需求,，可提供相關(guān)法規(guī)支持文件。
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