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低溫保存法
簡(jiǎn)單保存法,將瓊脂斜面孢子培養(yǎng)物,、菌絲懸浮液以及由麩皮,、大米、小米等谷物原料制成的孢子培養(yǎng)物置于4℃冰箱保存,保存時(shí)間不超過(guò)1~2個(gè)月,,若將谷物原料制備的孢子瓶抽真空并在棉塞上浸蠟,以隔絕外界空氣和水汽,保持時(shí)間可達(dá)3~4個(gè)月,;
液氮---溫保存法,,將生長(zhǎng)穩(wěn)定期的細(xì)胞懸浮在10%甘油或其他低冰點(diǎn)液體中,,密封于安瓿管內(nèi),然后控制冷卻速度,,使安瓿管溫度逐步下降至 -35℃時(shí),,即可置于-150~-196℃的液氮罐中保存。大多數(shù)微生物如---,、噬菌體,、多種---、酵母和原蟲,、---是一些用冷凍干燥法有困難的微生物,,都可用此法長(zhǎng)期保存。
脫水存法
沙土保存法,,能產(chǎn)孢子的---及霉菌可采用此法保存,即將沙和土以3:2比例混合,,經(jīng)稀酸處理洗凈過(guò)篩,裝入小試管內(nèi),裝置高度為1cm;滅菌2~3次,烘干后即可將在斜面培養(yǎng)基上生長(zhǎng)---的孢子,,用無(wú)菌蒸餾水2~2.5ml制成孢子懸液,,吸取少許加入沙土管中,經(jīng)真空抽干,,外觀呈松散狀態(tài),于4℃冰箱保存,,保存期可達(dá)5~7年。
冷凍干燥法,將孢子懸浮液與保護(hù)劑一般用脫脂牛奶相混合,,放在安瓿管內(nèi)于-20~-30℃的---浴中速凍,。然后,在低溫下用真空泵抽干,,并用氧化磷或干冰使水汽結(jié)凍,,熔封安瓿管,,于低溫下保存。保存期可達(dá)5~10年之久,。
石蠟油封存法,,在斜面菌種培養(yǎng)物上,倒上滅菌后的石蠟油,高出斜面1cm,,于4℃冰箱或低溫干燥處保存,,此法不適用于能利用石蠟油作碳源的微生物,保存期為一年以上,。
實(shí)驗(yàn)室的傳代保藏過(guò)程
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