上海莼試實(shí)業(yè)有限公司為您提供人雌二醇(e2)elisa試劑盒,。人雌二醇(e2)elisa試劑盒操作步驟
1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣：在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10孔，在di一,、第二孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品100μl,，然后在di一、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,，混勻,；然后從di一孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,，再在第三,、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,，混勻；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,，再各取50μl分別加到第五,、第六孔中，再在第五,、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul,，混勻；混勻后從第五,、第六孔中各取50μl分別加到第七,、第八孔中，再在第七,、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,，混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九,、第十孔中,，再在第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉,。稀釋后各孔加樣量都為50μl,，濃度分別為180 ng/l，120 ng/l ,，60 ng/l，30 ng/,，15 ng/l,。
2. 加樣：分別設(shè)空白孔空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同,、待測(cè)樣品孔,。在酶標(biāo)包被板上待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測(cè)樣品10μl樣品終稀釋度為5倍,。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻,。
3. 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘,。
4. 配液：將3048t的20倍倍濃縮洗滌液用蒸餾水3048t的20倍倍稀釋后備用。
5. 洗滌：小心揭掉封板膜,，棄去液體,，甩干，每孔加滿洗滌液,，靜置30秒后棄去,，如此重復(fù)5次,，拍干。
6. 加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,，空白孔除外,。
7. 溫育：操作同3。
8. 洗滌：操作同5,。
9. 顯色：每孔先加入顯色劑a50μl,，再加入顯色劑b50μl，輕輕震蕩混勻,，37℃避光顯色15分鐘.
10. 終止：每孔加終止液50μl,，終止反應(yīng)此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。
11. 測(cè)定：以空白空調(diào)零,，450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度od值,。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘。

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