生物素-酪胺信號放大試劑盒hrp底物 酪胺信號放大技術tsa,, tyramide signal amplification主要原理是,,在---0---存在情況下,標記在抗0體上的hrp將底物酪胺活化,,后者與相鄰的蛋白上的酪氨酸殘基生成穩(wěn)定的共價結合,,因此這些蛋白如hrp、抗0體上會富集大量帶有生物素標記的酪胺,,使信號被有效放大,。生物素為小分子化合物,分子量244,。親和素與生物素有---的親和力,結合牢固,,而且特---高,,每個親和素可結合4個生物素。用小分子生物素與hrp酶標記的親和素發(fā)生特---反應,,可減小抗原抗0體反應的空間位阻,,使反應明顯放大。
通用步驟
加血0清封閉液
1. 去掉片子上多余緩沖液。
2. 取適量血0清封閉液完全覆蓋切片,。
3. 在濕盒中室溫孵育 15min,。
4. 浸入洗滌緩沖液中 5min。
加一抗
1. 去掉切片上的多余洗滌緩沖液,。
2. 將稀釋的一抗加到切片上,,完全覆蓋組織細胞。
3. 在濕盒中室溫孵育 30min,。
4. 用洗滌緩沖液洗去一抗,,在洗液中潤洗 5min。
注:如果顯色速度過快,,建議進一步稀釋一抗,,將一抗稀釋度以 1/50、1/100,、1/200,、1/400 和 1/800,生物素標記試劑盒,,zui佳稀釋度的選擇是顯色 10min 后陽性顯色效果滿意而沒有背景顯色,。
運輸、儲存和有效期
常溫運輸,,室溫避光保存,,有效期 12 個月。
操作方法
蘇0木0精染液細胞學染色步驟:
1. 脫蠟,,水化,。
2. 將組織片浸入蘇0木0精染液 1~2 分鐘。
3. 換兩次蒸餾水,,每次浸入 10~20 次,。
4. 藍化:0.5~1%---,30 秒~1 分鐘,,涂片應該變藍色,。
5. 換兩次蒸餾水,每次浸入 10~20 次,。
6. 1%伊紅水溶液 5~10 分鐘
7. 蒸餾水快洗
8. 換三次 95%---,,每次浸入 10~20 次。
9. 換兩次無水---,,每次浸入 10~20 次,。
10. 換三次二甲0---,每次浸入 10~20 次,。
11. 封片,。
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