t4 rna連接酶

用途：用rna 3末端標記,；rna和rna分子間連接,；寡核苷酸的環(huán)化；trna修飾,；5 race中寡核苷酸連接到cdna單鏈,；在蛋白質(zhì)特定位點引入非天然---酸。

來源：由大腸桿1菌表達,，表達基因的來源為t4嗜菌體,。

活性定義：37℃30分鐘內(nèi)，催化1 nmol 5-[p]-(a)12-18成為磷酸酶不能---的環(huán)形產(chǎn)物所需的酶量定義為1個活性單位,。

活性檢測條件：50mm tris-hcl(ph7.5),，10mm mgcl2，10mm dtt,，1mm atp,，10μm 5-[p]-(a)12-18(10μm in 5-termini)。

純度：不含dna內(nèi)切酶和外切酶,，不含rna酶,，不含磷1酸酯酶。

酶儲存溶液：10mm tris-hcl(ph7.5),，1mm dtt,，50mm kcl，0.1mm edta,，50%(v/v)glycerol,。

reaction buffer(10x)：500mm hepes-naoh(ph8.0 at 25℃)，100mm mgcl2,，100mm dtt,。

dna連接酶與dna聚合酶用途不同

dna連接酶主要用于基因工程，將由---性-內(nèi)切酶“剪”出的粘性末端重新組合,，故也稱“基因針線”,。如基因工程中，大腸桿1菌連接酶連接黏性末端,，t4連接酶既可連接黏性末端,，又可連接平末端。

dna聚合酶在dna copy中起做用,，主要是連接dna部分片段與單個脫氧核苷酸之間的磷酸二酯鍵,。