無細胞系統(tǒng)是利用細胞提取物而不是細胞進行基因轉(zhuǎn)錄和翻譯的系統(tǒng)。一個無細胞基因表達系統(tǒng)主要包括三個部分:細胞提取物,,反應混合液,,以及---模板
1.細胞提取物:從細胞中提取的物質(zhì),主要包含核糖體,、rna聚合酶,、其他轉(zhuǎn)錄和翻譯蛋白比如σ因子、起始因子和延伸因子,,以及用于能量代謝的酶和輔因子,。在有些菌株的提取物中,可能抑制了蛋白酶和---酶的活性,。
2.反應混合液:包含蛋白質(zhì)合成所需的一些原料,,如---酸、核苷酸,、鹽離子如銨鹽,、鎂、鉀,、能源糖類,、磷酸肌酸等,、擁擠試劑crowding agents、代謝輔因子輔酶a,、nad,、緩沖液、trna以及其他代謝添加劑等,。
3.---模板:可以是質(zhì)粒dna或pcr產(chǎn)物線裝dna,,濃度通常在1-20 nm。
無細胞系統(tǒng)一般的反應體積為10微升,,但是根據(jù)其實際應用,,反應體系可以從10(-15)到103變化。在開始反應時,,將三種組分在16-37℃下孵育,,蛋白質(zhì)合成將在1-24h內(nèi)進行。
男性缺失蛋白質(zhì)比女性缺失蛋白質(zhì)更需要重視,,男士一旦缺失蛋白質(zhì),,會導致男性下降,wb增強劑,,活力降低以及不液化造成男性,。α---酸的結構通式蛋白質(zhì)是一種復雜的有機化合物,舊稱“朊ruǎn)”,。---酸是組成蛋白質(zhì)的基本單位,,---酸通過脫水縮合連成肽鏈。蛋白質(zhì)是由一條或多條多肽鏈組成的生物大分子,,每一條多肽鏈有二十至數(shù)百個---酸殘基-r不等,;各種---酸殘基按一定的順序排列。蛋白質(zhì)的---酸序列是由對應基因所編碼,。除了遺傳密碼所編碼的20種基本---酸,,在蛋白質(zhì)中,某些---酸殘基還可以被翻譯后修飾而發(fā)生化學結構的變化,,從而對蛋白質(zhì)進行或調(diào)控,。
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