上海莼試實業(yè)有限公司為您提供小鼠抵抗素樣蛋白αretnlaelisa試劑盒,。實驗原理
本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中豬雄烯酮(adt)水平,。用純化的豬雄烯酮(adt)抗體包被微孔板,，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入雄烯酮(adt),，再與hrp標(biāo)記的雄烯酮(adt)抗體結(jié)合,，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)過-洗滌后加底物tmb顯色,。tmb在hrp酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的雄烯酮(adt)呈正相關(guān),。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度od值,，通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中豬雄烯酮(adt)濃度。
標(biāo)本要求
1．標(biāo)本采集后盡早進行提取,，提取按相關(guān)文獻進行,，提取后應(yīng)盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,，可將標(biāo)本放于-20℃保存,，但應(yīng)避免反復(fù)凍融
2．不能檢測含nan3的樣品，因nan3抑制辣根---化物酶的hrp活性,。
操作步驟
1.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋：本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,，用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。
2.加樣：分別設(shè)空白孔空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,，其余各步操作相同,、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔,。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl樣品終稀釋度為5倍,。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻,。
3.溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘,。
4.配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
5.洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體,，甩干,，每孔加滿洗滌液,，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次,，拍干,。
6.加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50μl，空白孔除外,。
7.溫育：操作同3,。
8.洗滌：操作同5。
9.顯色：每孔先加入顯色劑a50μl,，再加入顯色劑b50μl,，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色10分鐘.
10.終止：每孔加終止液50μl,，終止反應(yīng)此時藍色立轉(zhuǎn)黃色,。
11.測定：以空白空調(diào)零，450nm波長依序測量各孔的吸光度od值,。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行,。
計算
以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo)，od值為縱坐標(biāo),，在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線,，根據(jù)樣品的od值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度；再乘以稀釋倍數(shù),；或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與od值計算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式,，將樣品的od值代入方程式,，計算出樣品濃度,，再乘以稀釋倍數(shù)，即為樣品的實際濃度,。
注意事項
1．試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,，酶標(biāo)包被板開封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存,。
2．濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結(jié)果,。
3．各步加樣均應(yīng)使用加樣器,，并經(jīng)常校對其準(zhǔn)確性，以避免試驗誤差,。一次加樣時間zui好控制在5分鐘內(nèi),，如標(biāo)本數(shù)量多，使用排槍加樣,。
4．請每次測定的同時做標(biāo)準(zhǔn)曲線,，zui好做復(fù)孔,。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高樣本od值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔---孔的od值，請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)n倍后再測定,，計算時請-乘以總稀釋倍數(shù)×n×5,。
5．封板膜只限-使用，以避免交叉污染,。
6．底物請避光保存,。
7．嚴(yán)格按照說明書的操作進行，試驗結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).
8．所有樣品,，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理,。
9．本試劑不同批號組分不得混用。
保存條件及有效期
1．試劑盒保存：2-8℃,。
2．有效期：6個月
上海莼試實業(yè)有限公司
聯(lián)系電話：
手機：
qq：3004967995 3004972506
聯(lián)系人：高
上海市嘉定區(qū)嘉羅公路1661號23號樓311
郵箱：[email protected]
     聯(lián)系時請說明是在云商網(wǎng)上看到的此信息,，謝謝！
     聯(lián)系電話：021-60443211,，13585831301,，歡迎您的來電咨詢！
     本頁網(wǎng)址：http://polopoo.com/cp/7456431.html
     推薦關(guān)鍵詞： elisa試劑, 菌種, 生化試劑, 細胞, 標(biāo)準(zhǔn)品