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1.標準品的稀釋與加樣
2.加樣:分別設空白孔空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同,、待測樣品孔,。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl樣品終稀釋度為5倍,。加樣將樣品加于酶標板孔底部,,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,。
3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘,。
4.配液:將3048t的20倍倍濃縮洗滌液用蒸餾水3048t的20倍倍稀釋后備用,。
5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,,甩干,,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,,如此重復5次,,拍干。
6.加酶:每孔加入酶標試劑50μl,,空白孔除外,。
7.溫育:操作同3。
8.洗滌:操作同5,。
9.顯色:每孔先加入顯色劑a50μl,,再加入顯色劑b50μl,輕輕震蕩混勻,,37℃避光顯色15分鐘.
10.終止:每孔加終止液50μl,,終止反應此時藍色立轉黃色。
11.測定:以空白空調零,,450nm波長依序測量各孔的吸光度od值,。測定應在加終止液后15分鐘以內進行。
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